La isoliensinina de los rizomas de Cissampelos pariera exhibe un potencial gametocitocida y anti

Malaria Journal volumen 22, Número de artículo: 161 (2023) Citar este artículo

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La demanda insatisfecha de agentes bloqueadores de la transmisión de la malaria efectivos que se dirijan a las etapas transmisibles de Plasmodium requiere esfuerzos intensivos de descubrimiento. En este estudio, se identificó una bisbencilisoquinolina (BBIQ) bioactiva, isoliensinina, de los rizomas de Cissampelos pariera (Menispermaceae) y se caracterizó por su actividad antipalúdica.

Se realizó el ensayo de fluorescencia Malaria SYBR Green I para evaluar la actividad antipalúdica in vitro contra los clones D6, Dd2 y F32-ART5, y la susceptibilidad inmediata ex vivo (IEV) para 10 aislamientos de P. falciparum recién recolectados. Para determinar la velocidad y la etapa de acción de la isoliensinina, se realizó un ensayo de velocidad IC50 y análisis morfológicos utilizando asexuales Dd2 sincronizados. La actividad gametocitocida frente a dos aislados clínicos productores de gametocitos adaptados al cultivo se determinó utilizando lecturas microscópicas, con posibles dianas moleculares y sus afinidades de unión deducidas in silico.

La isoliensinina mostró una potente actividad gametocitocida in vitro a valores medios de IC50gam que oscilaban entre 0,41 y 0,69 µM para aislados clínicos de Plasmodium falciparum. El compuesto BBIQ también inhibió la replicación asexual a una IC50Asexual media de 2,17 µM, 2,22 µM y 2,39 µM para D6, Dd2 y F32-ART5 respectivamente, teniendo como objetivo la transición de trofozoíto tardío a esquizonte. La caracterización adicional demostró una potencia ex vivo inmediata considerable frente a aislados clínicos humanos con una media geométrica IC50IEV = 1,433 µM (IC del 95 %: 0,917–2,242). Los análisis in silico postularon un probable mecanismo de acción antipalúdico por altas afinidades de unión por cuatro proteínas quinasas de división mitótica; Pfnek1, Pfmap2, Pfclk1 y Pfclk4. Además, se predijo que la isoliensinina poseería un perfil farmacocinético y propiedades similares a las drogas óptimos.

Estos hallazgos resaltan motivos considerables para una mayor exploración de la isoliensinina como un andamio susceptible para la química de bloqueo de la transmisión de la malaria y la validación del objetivo.

Las estrategias terapéuticas anticipadas para bloquear la diferenciación sexual y la maduración de los gametocitos de Plasmodium [1, 2], antes de que los mosquitos anofelinos hembra los absorban, reducirían la transmisión de la malaria en pliegues de magnitud [3]. En consecuencia, la ausencia de intervenciones tan efectivas para bloquear la transmisión ha resultado en más de 234 millones de nuevas infecciones y 593 000 muertes reportadas en el África subsahariana en 2021. Los gametocitos de Plasmodium falciparum tardan entre 12 y 14 días en madurar mientras están secuestrados en la médula ósea y el bazo [ 4]. En estos nichos vasculares, los parásitos muestran cambios de desarrollo dinámicos en preparación para una transición de fase de humano a mosquito. Con tal fenómeno de búsqueda, los gametocitos a través de las transformaciones morfológicas de las etapas I-V remodelan activamente las células huésped de manera reversible, lo que permite las retenciones vasculares [5,6,7]. La maduración final de los gametocitos en estadio IV a V se caracteriza por el desmontaje del citoesqueleto estructural en puntas redondeadas que coincide con una mayor deformabilidad celular inducida por el monofosfato de adenosina cíclico (cAMP) y STEVOR [8, 9]. En la fosforilación de P. falciparum STEVOR, los gametocitos maduros en etapa V abandonan los nichos de la médula ósea y persisten durante días o semanas en la circulación periférica a la espera de que los mosquitos los absorban durante la adquisición de la sangre [9]. Como se demostró previamente [10,11,12,13,14,15,16], el desarrollo de Plasmodium está estrechamente regulado por una red robusta de perfiles transcripcionales específicos de etapa y sexo, expresiones de proteínas y coordinación metabólica fisiológica. A pesar de esta biología y conocimiento vitales de los gametocitos, el ritmo de descubrimiento de fármacos para inhibidores contra estos parásitos transmisibles parece bastante lento.

La mayoría de los fármacos antipalúdicos actualmente disponibles que actúan más allá de la replicación asexual no logran eliminar por completo los gametocitos maduros en etapa V que circulan periféricamente [17], lo que permite la transmisión a los mosquitos vectores [18, 19]. Esta limitación, además de las tendencias actuales y futuras de resistencia a la malaria, demuestra la necesidad urgente de nuevas entidades químicas. En los últimos años, varias plataformas de detección de alto rendimiento (HTS) [20,21,22,23,24,25,26,27,28,29,30,31] han identificado diversos andamios químicos con alto potencial para la transmisión de la malaria. -bloqueo. Los esfuerzos para optimizar algunas de estas moléculas en candidatos principales acompañados de deconvoluciones objetivo han producido KAE609 [32], DDD107498 [33], (+)-SJ557733 [34], ACT-451840 [35], MMV390048 [36] por mencionar algunos , que actualmente se encuentran en los primeros ensayos clínicos. Sin embargo, los inconvenientes pertinentes relacionados con la falta de diversidad química y de destino y las altas tasas de deserción son motivo de gran preocupación [37]. Los productos naturales, incluidas las hierbas antipalúdicas ortogonales [38], se han buscado alternativamente para los agentes bloqueadores de la transmisión de Plasmodium. Bajo estos esfuerzos de descubrimiento antipalúdicos, varios compuestos naturales que incluyen: maduramicina [22], partenina y partenolida [39], tiostrepton, epoxomicina [40], monensina, salinomicina, nigericina [41], derivados del ácido (+)-úsnico (BT37 y BT122) [42], derivados de naftilisoquinolina [43], azadiractina A [44], vernodalol [45], 1α,4α-dihidroxibishopsolicepolida [46], p-orlandina [47], criptolepina [48], lanceolina B [49 ], la dihidronitidina [50], la daucovirgolida G [51] y la lophirona E [52] matan los gametocitos in vitro o previenen su desarrollo esporogónico en el intestino medio del mosquito.

Como parte de la búsqueda continua de nuevos andamios antipalúdicos versátiles, en particular productos naturales con capacidad de bloqueo de la transmisión de Plasmodium [53], la pantalla actual identificó un agente de éxito de bisbencilisoquinolina (BBIQ) prometedor. Los BBIQ, que generalmente se caracterizan por subtipos de enlace de éter estructural de cola a cola, cabeza a cabeza y cabeza a cola [54], presentan andamios de fármacos para múltiples dolencias. Esta clase química particular se dirige preferentemente a las vías de señalización de Ca2+ de tipo L y T en células de mamíferos, además de la modulación de los canales de salida de membrana del transportador ABC y las familias de glicoproteína P (P-gp) [55, 56]. En Plasmodium, la movilización de Ca2+ intracelular acompañada de la expresión concomitante de proteínas quinasas dependientes de Ca2+ efectoras de tipo vegetal, PfCDPK1 – PfCDPK7, inicia eventos oportunos específicos de quinasa; salida de merozoitos e invasiones de glóbulos rojos (CDPK1, CDPK5), crecimiento asexual (CDPK2, CDPK7), activa exflagelaciones masculinas (CDPK2, CDPK4), motilidad de deslizamiento de ookinetes (CDPK3), motilidad de esporozoitos e invasión de hepatocitos (CDPK6) (revisado en [57]) . En el contexto de la reversión de la resistencia a la malaria, estudios previos sobre BBIQ también han demostrado una posible sensibilización de los parásitos Plasmodium resistentes a la quinolina a través de una acción sinérgica [58, 59]. La sensibilización de CQ subyacente por BBIQ sugiere posibles efectos moduladores sobre la actividad de salida de cloroquina (CQ) de su transportador PfCRT. A pesar de exhibir estas interesantes propiedades farmacológicas, incluidas las potentes actividades antipalúdicas de IC50 < 1 µM [59,60,61,62], los compuestos que contienen BBIQ no se han buscado más para el desarrollo antipalúdico hasta la fecha, tal vez debido a su profunda complejidades estructurales. Entre los BBIQ está representada la isoliensinina (Fig. 1A), que primero se aisló de embriones de semillas de loto (Nelumbo nucifera, Nelumbonaceae) [63] y luego de Cissampelos mucronata [64]. El perfil de actividad antipalúdica de la isoliensinina está pobremente caracterizado hasta el momento. En este documento, se ha descrito y notificado la primera caracterización antipalúdica detallada de la isoliensinina de los rizomas de Cissampelos pariera (archivo adicional 1: Fig. S1-S2) como un agente selectivo de gametocitos con potencial de bloqueo de la transmisión de la malaria contra aislados clínicos humanos de Plasmodium. El estudio describe además su potente efecto de inhibición de acción relativamente lenta en las etapas asexuales, actuando preferentemente en el paso de transición de trofozoíto a esquizonte maduro. Los posibles objetivos moleculares extraídos y validados a través de un enfoque computacional destacaron una alta afinidad por el transporte transmembrana y las proteínas reguladoras de la división mitótica. Los hallazgos actuales proporcionan un andamio de productos naturales con potencial de bloqueo de la transmisión de Plasmodium susceptible de un mayor desarrollo en candidatos excelentes que pueden ser adiciones efectivas al arsenal antipalúdico para tratar y prevenir las transmisiones de malaria.

Efectos del tratamiento con isoliensinina en gametocitos IV/V en etapa tardía de aislamientos clínicos humanos de Plasmodium falciparum. A Estructura química de la isoliensinina, B La isoliensinina reduce la supervivencia de los gametocitos en estadio IV/V. Las curvas de dosis-respuesta de isoliensinina frente a gametocitos en estadio IV/V estimaron valores de IC50gam en 0,2528 µg/mL (0,41 ± 0,043 µM), 0,4241 µg/mL (0,69 ± 0,019 µM) para MGT 0063 (aislado de Marigat) y KCH 016 /19 (aislado de Kericho) Aislados clínicos de Plasmodium, respectivamente (n = 3 réplicas independientes). Las barras de error indican la desviación estándar (sd). La primaquina sirvió como control positivo en estos ensayos con una IC50gam media de 7,46 ± 0,102 µM. C: Cambios morfológicos de gametocitos en el tratamiento con isoliensinina capturados de portaobjetos teñidos con Giemsa con un objetivo de inmersión en aceite de 100 ×. Carril 1: gametocitos tratados con DMSO al 0,2 %, Carril 2: gametocitos tratados con isoliensinina y Carril 3: gametocitos tratados con primaquina

Medicamentos contra la malaria; dihidroartemisinina (DHA), clorhidrato de mefloquina (MQ), monodesetilamodiaquina (AMQ), arteméter (ARM), difosfato de cloroquina (CQ), lumefantrina (LUM), tetrahidrato de piperaquina (PPQ), atovacuona (ATQ), artemisinina (ART), artesunato ( ARS), quinina (QN) y primaquina (PQ) se obtuvieron de la Red Mundial de Resistencia Antipalúdica (WWARN). Los detalles sobre la purificación y caracterización de la isoliensinina se incluyen en el Archivo adicional 1: Métodos S1. A menos que se indique lo contrario, todos los compuestos farmacológicos se disolvieron en DMSO al 100 % y se reconstituyeron en las concentraciones deseadas para el ensayo.

Parásitos intraeritrocíticos asexuales de P. falciparum; Los clones D6, W2, Dd2 y F32-ART5 se cultivaron como se describió anteriormente [65], con modificaciones menores. Brevemente, los eritrocitos parasitados al 0,5 % de parasitemia en 4 % de hematocrito (sangre humana O+) se cultivaron a 37 ºC con 90 % de N2, 5 % de CO2 y 5 % de O2 en medio RPMI 1640 (Gibco Life Technologies) suplementado con 20 % de ABO inactivado por calor. suero humano, 5,94 g/l de HEPES (Sigma-Aldrich), 2 g/l de glucosa, 2 mM de l-glutamina, 4 µg/ml de hipoxantina y 2 g/l de NaHCO3 (Sigma-Aldrich). Para generar cultivos altamente sincrónicos, se realizaron tratamientos con D-sorbitol al 5 % (p/v) en la etapa de anillo durante 10 min a 37 °C. El medio gastado se reemplazó asépticamente cada dos días hasta alcanzar el nivel máximo de parasitemia (5–8 % de anillos), durante el cual se dispensaron 100 µl de suspensión de parásitos reconstituidos con 1 % de parasitemia y 2 % de hematocrito en placas de 96 pocillos predosificadas del compuesto, para una incubación de 72 h a 37 °C. La concentración final de DMSO en todos los ensayos no superó el 0,2 % v/v. La actividad de inhibición de la replicación se analizó en 3 réplicas mediante lecturas basadas en SYBR Green I como se describió anteriormente [66]. Se realizó un ensayo de susceptibilidad ex vivo inmediato (IEV) [66] contra aislados clínicos de P. falciparum (0–6 h después de la recolección de flebotomía; a un nivel de parasitemia ≥ 1 %) recolectados de individuos con paludismo no complicado que dieron su consentimiento en las clínicas del sitio de estudio de Kisumu y Kombewa (Protocolos aprobados; KEMRI SSC # 1330 y WRAIR # 1384). Los parásitos circulantes dentro de esta región endémica de Kenia Occidental se caracterizaron previamente como monorresistentes o multirresistentes o con susceptibilidad reducida a CQ, sulfadoxina/pirimetamina (SP), doxiciclina (DOX), QN, LUM y MQ [67,68,69 ,70,71]. Después de un ajuste al 1 % de parasitemia, estos parásitos recién recolectados se analizaron directamente sin una adaptación previa al cultivo, junto con un panel de medicamentos antipalúdicos estándar.

Para investigar la velocidad y la etapa de acción de la isoliensinina contra los asexuales, se examinaron anillos Dd2 sincronizados (0–5 h después de la invasión (hpi); > 98 %), respectivamente, al 1 % de parasitemia contra parásitos tratados con DMSO en diferentes períodos de tratamiento dentro de la replicación intraeritrocítica de 48 horas; 5–16, 17–29 y 29–41 hpi [72]. Se adoptó el ensayo de velocidad SYBR Green I IC50 para la especificidad de tiempo de la acción de la isoliensinina dentro del análisis estándar de 72 h. Después de cada período de tratamiento, se realizaron análisis morfológicos de parásitos específicos de etapa e imágenes de películas delgadas teñidas con Giemsa.

La inducción de gametocitos de aislados clínicos humanos adaptados al cultivo (KCH 016/19 y MGT 0063 de Kericho y Marigat, respectivamente) se realizó de acuerdo con el método publicado [73]. Se prepararon frotis teñidos con Giemsa regularmente durante los cambios de medio en los días 5, 8 y 12 después de la inducción. Gametocitos enriquecidos con Percoll (42 % etapa IV; 58 % etapa V) con un hematocrito del 2 % se dispensaron en 100 µl por pocillo en placas de 96 pocillos predosificadas que contenían 50 µl de isoliensinina (concentración máxima de 20 µg/ml). Se incluyeron vehículo DMSO al 0,2% (v/v) y PQ como controles negativo y positivo, respectivamente. Los parásitos se incubaron durante 72 h a 37 °C en una atmósfera humidificada de 90 % N2, 5 % CO2 y 5 % O2. Se prepararon frotis de sangre finos de cada pocillo, se tiñeron con Giemsa y se determinó el porcentaje de inhibición de gametocitos a partir de lecturas de microscopía óptica de 2000–3000 glóbulos rojos según la categorización morfológica; alterado/deformado (muerto/moribundo) versus normal (sano) [74]. Se llevaron a cabo tres repeticiones independientes de análisis experimentales (n = 3).

Las predicciones objetivo de isoliensinina se realizaron en una base de datos ChEMBL seleccionada y de acceso público (https://www.ebi.ac.uk/chembl/) en función de sus huellas dactilares químicas, como se describió anteriormente [75]. Las secuencias de proteínas objetivo respectivas se recuperaron de la base de datos UniProt (https://uniprot.org/) para consultar el mapeo de ortología contra PlasmoDB (www.plasmodb.org/) utilizando la función BLASTp en la configuración predeterminada. Los objetivos de proteína de Plasmodium resultantes se agruparon en función de los roles funcionales anotados (función molecular) en referencia a los datos publicados de transcriptoma y proteoma específicos de la etapa [10]. Para realizar el acoplamiento molecular de la isoliensinina frente a objetivos seleccionados, se construyeron modelos de homología 3D utilizando el servidor de modelado de homología SWISS-MODEL (https://swissmodel.expasy.org) a partir de secuencias de proteínas (.fasta) recuperadas de PlasmoDB (archivo adicional 1: Tabla S5). La calidad de los modelos estructurales pdb resultantes se evaluó utilizando parámetros de gráficos de Ramachandran. El archivo isoliensinine 2D.sdf (ZINC42806008) se descargó como ligando de acoplamiento de la base de datos ZINC15. Después de la minimización de la energía de la isoliensinina mediante un campo de fuerza universal (uff; 200 pasos) con el algoritmo de gradientes conjugados y la conversión al formato de ligando AutoDock .pdbqt en la herramienta OpenBabel, las simulaciones de acoplamiento se realizaron con AutoDock Vina en PyRx 0.8: herramienta de detección virtual en X:Y predeterminado :Z 25 × 25 × 25 Å Ajuste del espacio de búsqueda de Vina. Las puntuaciones de acoplamiento para las energías de afinidad de unión libre más bajas se registraron para cada objetivo, se clasificaron y las visualizaciones de las interacciones moleculares 2D se analizaron con Biovia Discovery Studio 2020 Visualizer (v20.1.0.19295; Dassault Systèmes). Las predicciones de isoliensinina ADMET se realizaron en SWISSADME (http://www.swissadme.ch).

Se utilizó el software Graphpad Prism (GraphPad Prism v.7.0 para Windows, San Diego, CA) para el análisis de datos. Se ajustó un modelo de regresión no lineal para lecturas de unidades relativas fluorescentes (RFU) normalizadas frente a concentraciones de fármaco transformadas en log10 para gráficos de dosis-respuesta sigmoidea para estimar los valores de IC50 para asexuales. Los parámetros utilizados fueron; dosis logarítmica de cuatro parámetros con una pendiente variable: ajuste Y = Inferior + (Superior-Inferior)/[1 + 10^((LogIC50-X) × HillSlope)]. Para la determinación de la IC50 gametocitocida, se representaron gráficamente las inhibiciones porcentuales promedio para cada dosis de tratamiento frente a las dosis transformadas en log10 mediante un análisis de regresión no lineal [74]. Los valores medios geométricos de IC50 para datos ex vivo inmediatos continuos (IEV) se analizaron con intervalos de confianza del 95 % (IC del 95 %) utilizando estadísticas de columna. Las correlaciones entre los valores de IC50 entre los tratamientos antipalúdicos se calcularon mediante el análisis de coeficiente de rango no paramétrico de Spearman. Las diferencias entre dos grupos de tratamiento independientes se analizaron mediante la prueba t de Student y un valor de p inferior a 0,05 se consideró estadísticamente significativo.

Inicialmente, se examinaron 13 extractos de plantas frente a P. falciparum W2 en busca de antipalúdicos activos. Los resultados obtenidos por este cribado condujeron al aislamiento e identificación de un agente antipalúdico activo en el extracto de rizoma de C. pariera (Menispermaceae), revelado como isoliensinina. La isoliensinina es un potente inhibidor del ciclo celular de la fase G1 con actividades anticancerígenas [76] y anti-VIH [77], junto con una actividad antipalúdica previamente informada de una especie congenérica C. mucronata (IC50Asexual = 124,3 ng/mL D6; 133,5 ng/mL W2) [64]. Al igual que con dicha actividad antes mencionada, se exploró la isoliensinina aislada de rizomas de C. pariera por su actividad antiplasmodial para caracterizar farmacológicamente su perfil de actividad contra las etapas asexual y sexual transmisible de Plasmodium. A partir de los datos presentados en la Tabla 1 y Archivo adicional 1: Tabla S1 - S2, el producto natural isoliensinina inhibió la replicación intraeritrocitaria de todos los parásitos probados en el rango micromolar inferior (media IC50Asexual = 2,17 µM para D6, 2,22 µM para Dd2 y 2,39 µM para F32-ART5). Se demuestra además que, al igual que los medicamentos antipalúdicos de referencia; artesunato (ARS), dihidroartemisinina (DHA), atovacuona (ATQ), arteméter (ARM), piperaquina (PPQ) y amodiaquina (AMQ), isoliensinina no exhibió resistencia cruzada, RI (índice de resistencia) < 10 (Tabla 1) , lo que sugiere un mecanismo inhibidor/destructivo posiblemente diferente. Sorprendentemente, el tratamiento con isoliensinina mostró una selectividad significativa de cinco veces contra los gametocitos IV/V en etapa tardía sobre los asexuales (prueba t de Student, t = 8,464, p = 0,007), con valores de potencia IC50gam media micromolar baja que oscilan entre 0,41 y 0,69 µM (Fig. .1B). Esta observación parece sugerir una mejor sensibilidad y/o captación del agente antipalúdico por parte de los gametocitos IV/V de etapa tardía que metabolizan menos, similar a un hallazgo reciente con bichalcona lophirone E de Lophira lanceolata (IC50gam = 0,14 µM, IC50Asexual = 12,23 µM W2, 38,47 µM 3D7) [52]. Las distorsiones morfológicas inducidas por isoliensinina consistieron en; contracción, pérdida del contorno estructural exterior y daño nuclear (Fig. 1C).

Además, cuando se probó contra asexuales de Plasmodium derivados de aislados clínicos humanos recolectados en la región de Kisumu, usando un ensayo de susceptibilidad ex vivo inmediato (IEV), la isoliensinina mantuvo consistentemente su eficacia terapéutica micromolar baja en la media geométrica IC50IEV = 1,433 µM (95% IC 0,917– 2.242, n = 10 aislamientos (Archivo adicional 1: Tabla S3, Fig. 2). Sin embargo, no se observaron correlaciones inhibitorias significativas basadas en el coeficiente de rango de correlación de Spearman entre los valores de IC50 emparejados que podrían implicar resistencia cruzada (Tabla 2).

Patrones de distribución de susceptibilidades ex vivo inmediatas de aislados clínicos de Plasmodium falciparum a isoliensinina y fármacos antipalúdicos estándar. La media geométrica de IC50sIEV para los 10 aislamientos clínicos fue; CQ = 0,011 µM (IC del 95 % 0,008–0,016), AMQ = 0,005 µM (IC del 95 % 0,004–0,007), DHA = 0,005 µM (IC del 95 % 0,003–0,010), ARS = 0,002 µM (IC del 95 % 0,002–0,004) ), MQ = 0,016 µM (0,010–0,026), ARM = 0,005 µM (IC del 95 % 0,003–0,007), PPQ = 0,046 µM (IC del 95 % 0,030–0,070), ATQ = 0,003 µM (IC del 95 % 0,001–0,005) , ART = 0,010 µM (95 % IC 0,007–0,014), LUM = 0,132 µM (95 % IC 0,070–0,250), QN = 0,062 µM (95 % IC 0,038–0,102) e isoliensinina = 1,433 µM (95 % IC 0,917 –2.242). Cada punto representa un solo aislamiento. Las líneas horizontales entre los patrones de distribución representan la mediana de IC50 para los tratamientos respectivos

Después de la caracterización del perfil antipalúdico de la isoliensinina contra los parásitos Plasmodium, se determinó la etapa objetivo precisa del ciclo intraeritrocitario de ~ 48 h. En primer lugar, se realizó un ensayo específico de tiempo SYBR Green I con parásitos Dd2 sincrónicos. Durante la incubación inicial de 24 h, los parásitos parecían insensibles al tratamiento con isoliensinina y presentaban una curva lineal, pero la actividad apareció entre las 24 y las 48 h y alcanzó su punto máximo entre las 48 y las 72 h posteriores a la incubación con una curva sigmoidea suave (Fig. 3A). En consecuencia, la isoliensinina mostró una acción antipalúdica inicial in vitro relativamente lenta, similar a los antifolatos de acción tardía, la sulfadoxina/pirimetamina y el MMV390048 [36]. Para delinear la etapa exacta de inhibición, se trató un cultivo Dd2 altamente sincronizado en la etapa de anillo en los períodos de tiempo respectivos (ver Métodos). La actividad antipalúdica se ejerció dentro del primer ciclo de replicación de 48 h. Esto excluyó la posibilidad de un efecto de muerte retardada ejercido por los antibióticos dirigidos a los apicoplastos, como la doxiciclina, la azitromicina, la tetraciclina y la clindamicina, que se producen como resultado de la interrupción del tráfico intracelular dependiente de la prenilación [78]. El desarrollo de Plasmodium fracasó de manera más pronunciada para progresar más allá de los trofozoítos tardíos, lo que indica objetivos críticos en esta etapa del parásito antes de la replicación del ADN. Morfológicamente, los parásitos tratados con isoliensinina mostraron trofozoítos maduros picnóticos encerrados por una membrana plasmática agrandada y ampollada (Fig. 3B), lo que refleja en parte los efectos del desequilibrio iónico asociado con los ionóforos [32, 41]. Se observaron otros efectos nocivos en los esquizontes, caracterizados por una división mitótica defectuosa que presentaba material nuclear agregado (Fig. 3B). En las células tumorales, se ha demostrado que la isoliensinina detiene la división celular [76]. De manera similar, el tratamiento de los trofozoítos de Plasmodium Dd2 con isoliensinina entre 29 y 41 hpi resultó en la falta de segmentadores de esquizontes maduros (Fig. 3B), observados en parásitos tratados con DMSO. Esta detención específica del esquizonte en la división nuclear y celular caracterizada por material nuclear no dividido sugiere una maquinaria de división mitótica deteriorada que, de lo contrario, da como resultado 18 a 24 núcleos de merozoítos infecciosos. Dichos fenotipos de tratamiento estancados se asemejan a los ejercidos por NITD609 (inhibidor de PfATP4) [32], DDD107498 (síntesis de proteínas: inhibidor de PfeEF2) [33], AN3661 (factor de procesamiento de pre-mRNA: inhibidor de PfCPSF3) [79], cladosporina (lisil-tRNA sintetasa inhibidor) [80], NED-19 (inhibición de NAADP) [81], TCMDC-135051 (empalme de ARNm, inhibidor de PfCLK3) [82], aminopirimidinas y oxo-β-carbolinas (pre-empalme de ARNm, inhibidores de CLK) [83] , y tetratiomolibdato (TTM) (desestabilizador de la homeostasis Cu2+) [84], lo que sugiere posibles mecanismos similares.

Efectos del tratamiento de isoliensinina en el desarrollo de Plasmodium. A Evolución temporal de la cinética inhibidora de la respuesta a la dosis de la acción de la isoliensina contra Dd2 en cuatro réplicas independientes del ensayo de velocidad SYBR Green I IC50 (n = 4). Cada punto representa un valor medio de las réplicas experimentales para los períodos representativos y las barras de error indican la desviación estándar (sd). B Imágenes representativas que representan los efectos de especificidad de etapa ejercidos contra la maduración de trofozoítos y esquizontes maduros. Los frotis se realizaron después del tratamiento con isoliensinina a 2,2 µM. Se trataron alícuotas de parásitos Dd2 sincronizados en estadios anulares de parasitemia al 1 % a las 5–16, 17–29 y 29–41 hpi. Se utilizó el examen morfológico por microscopía óptica, con un objetivo de inmersión en aceite de 100 ×, para detectar la especificidad de la etapa de acción en relación con el tratamiento de control con DMSO, como se describe en la sección Métodos. Se realizaron tres réplicas experimentales independientes (n = 3)

Se implementó un enfoque bioinformático basado en datos de ensayos históricos para extraer objetivos de proteína putativos en una base de datos ChEMBL de acceso público, prediciendo 54 objetivos activos putativos (Archivo adicional 1: Tabla S4). La mayoría de estos objetivos candidatos principales se agruparon en receptores acoplados a proteína G (GPCR) (18/54; 33,33 %), proteínas nucleares (9/54; 16,67 %), proteasas (7/54; 12,96 %), proteína quinasas ( 6/54; 11,11%) y oxidorreductasas (5/54; 9,26%) (fig. 4A). Objetivos homólogos de Plasmodium anotados funcionalmente (36) agrupados en; proteínas quinasas (8), oxidorreductasas (4), proteínas nucleares (5), proteínas de membrana (7), proteínas variantes clonales (4), hidrolasas (2), otras (6) y 18 desconocidos que carecen de homología plasmodial (Fig. 4B ). Los objetivos desconocidos fueron 11 GPCR, 2 proteasas, 1 quinasa, 2 hidrolasas y 2 receptores nucleares (Archivo adicional 1: Tabla S5). Cuando se clasifican según sus funciones plasmodiales, la mayoría se agrupa para la regulación del ciclo celular (8) y funciones de membrana (7), con pocos enriquecidos para la fosforilación de proteínas (4), procesamiento de ARN (4), citoadherencia (4), biosíntesis de ácidos grasos ( 2), transducción de señales (2), metabolismo (2) y otros (3) (Fig. 4B). Sobre la base de estos objetivos, se postuló que el mecanismo de acción antipalúdico de la isoliensinina involucraba mecanismos de dos pasos en el tráfico transmembrana y la división mitótica, objetivos de fármacos antipalúdicos actualmente priorizados bajo investigación activa.

Análisis de objetivos formulando hipótesis de modo de acción. A Distribución de las 54 clases objetivo predichas afectadas por la isoliensinina. Se registraron todos los objetivos celulares de mamíferos marcados como "activos" predichos en la base de datos ChEMBL con una confianza del 70 al 90 % para la isoliensinina (ID: ChEMBL502370) y se identificaron sus clases. El número total de cada clase se indica entre paréntesis. B: Clasificación funcional de los homólogos de Plasmodium identificados con éxito. Recuadro: clases objetivo enriquecidas después de búsquedas de homología en PlasmoDB. Las secuencias de proteínas de los respectivos objetivos predichos recuperados de la base de datos UniProt (usando ID de ChEMBL) se usaron para consultar PlasmoDB usando la función BLASTp. Los ortólogos devueltos en función de la puntuación de identidad se clasificaron funcionalmente utilizando anotaciones en PlasmoDB y resultados de caracterización en la literatura publicada.

Para validar la hipótesis de predicción de objetivos in silico, se realizó un análisis de acoplamiento molecular inverso contra 66 proteínas reguladoras de la división celular de Plasmodium y 16 transportadores transmembrana, incluidos otros 4 objetivos con fenotipos de tratamiento similares: ATP4, eEF2, CLK3 y CPSF3 (archivo adicional 1: Tabla S5). Se estableció que se priorizaron cuatro proteínas quinasas esenciales; 2 Ser/Thr: PfCLK1 (−10,0 kCal/mol) y PfCLK4 (−9,8 kCal/mol); 1 Nima: PfNek1 (− 10,8 kCal/mol); y 1 CGMC: PfMap2 (−10,0 kCal/mol) tuvo interacciones de energía de enlace libre negativa alta (<-9,6 kCalmol−1 de corte) con isoliensinina en sus respectivos bolsillos de enlace (Tabla 3). Un único simportador de lactato/H+ transmembrana susceptible de fármaco, PfFNT, interaccionó fuertemente con la isoliensinina con una puntuación de energía de unión de −9,1 kCal/mol. La isoliensinina demostró distintos perfiles de unión con residuos de proteínas de los objetivos de Plasmodium utilizando seis interacciones de unión clave; el enlace de hidrógeno convencional, π-catión, π-sigma, π-alquilo, alquilo y fuerzas de van der Waals (Fig. 5).

Modos de unión de isoliensinina en proteínas diana de Plasmodium. a PfNek1, b PfMap2, c PfClk1 y d PfClk4. Los modos de interacción bidimensionales (2D) de la isoliensinina con los objetivos de la proteína Plasmodium se analizaron utilizando el visualizador Discovery Studio después del acoplamiento molecular en el software PyRx.

Finalmente, las propiedades ADME de la isoliensinina por su similitud con las drogas, los riesgos toxicológicos o la farmacocinética se perfilaron utilizando la plataforma SWISSADME basada en la web y los resultados se proporcionan en el Archivo adicional 1: Tabla S6. Se predijo que la isoliensinina tendría una puntuación de biodisponibilidad oral óptima, una alta absorción intestinal y no sería tóxica para las cinco principales isoformas metabólicas humanas del CYP450 (CYP1A2, CYP2C19, CYP3A4, CYP2C9 y CYP2D6). Además, se encontró que la isoliensinina no atraviesa la barrera hematoencefálica, pero es capaz de inhibir los mecanismos de salida de fármacos celulares basados en la actividad de la glicoproteína p. No se encontraron similitudes estructurales con los compuestos de interferencia panensayo (PAINS), sin embargo, las estrategias de química médica para mejorar este compuesto deben centrarse en su solubilidad en agua y reducir el peso molecular a < 500. Con tal perfil ADME in silico, la isoliensinina proporciona un andamio prometedor para el desarrollo de fármacos sin posibles riesgos responsables.

Las tasas de transmisión y la carga global sostenida de la malaria continúan dando prioridad a la búsqueda de intervenciones apropiadas que puedan incapacitar de manera factible la infectividad de los gametocitos transmisibles a los mosquitos. Centrado en este objetivo difícil de alcanzar de la eliminación de la malaria, y en un intento de expandir el espacio químico finito existente para esta etapa de parásito enfatizada, este estudio identificó un compuesto de bisbencilisoquinolina (BBIQ) y caracterizó de manera integral su actividad contra la malaria. Este BBIQ mostró una considerable actividad gametocitocida selectiva. Además, el agente antipalúdico identificado inhibió las replicaciones asexuales al bloquear la transición de los trofozoítos maduros a los esquizontes. Los resultados del estudio proporcionan la primera caracterización detallada del perfil antipalúdico de la isoliensinina de los rizomas de C. pariera. De acuerdo con estudios previos que describieron los BBIQ como posibles antipalúdicos restringidos a las etapas asexuales del parásito [59,60,61,62], la isoliensinina también se estableció para inhibir los parásitos asexuales, aunque con una potencia ligeramente menor. Aparte de esta observación inicial, la isoliensinina inhibía activamente los aislados del parásito P. falciparum de muestras clínicas humanas a una media geométrica IC50IEV = 1,433 µM. Antes de este estudio, ninguno de los BBIQ informados anteriormente se había probado contra aislados de parásitos contemporáneos derivados clínicamente. Este hallazgo sin precedentes tiene un potencial emocionante para el manejo de parásitos de antecedentes genéticos muy diversos que surgen de la presión de selección actual impulsada por los regímenes de terapia combinada (ACT) basados en artemisinina. Los hallazgos actuales demuestran claramente que la isoliensinina posee una impresionante actividad gametocitocida en lo que respecta al bloqueo de las transmisiones de parásitos. Tal susceptibilidad de los gametocitos sobre los asexuales a la isoliensinina probablemente apunta a la expresión selectiva de sus objetivos en los primeros que facilitan una mejor eficacia. La dihidroisoquinolona [34], la 1α,4α-dihidroxibishopsolicepolida [46] y las bichalconas [52] mostraron efectos selectivos similares. Sin embargo, este fenómeno está sujeto a más interrogantes debido a las diferentes expresiones transcriptómicas y proteómicas específicas de la etapa [16].

Dirigiendo la atención hacia la comprensión de los efectos antipalúdicos que muestra la isoliensinina, se determinaron la cinética inhibitoria y la especificidad de la etapa de acción. Se encontró que la isoliensinina era de acción relativamente lenta, inhibiendo la progresión del desarrollo de las etapas de sangre asexuales maduras tardías, lo que resultó en el colapso de la progenie tratada. A diferencia de los hallazgos informados de un estudio anterior [60], que demostró que una cefarantina BBIQ relacionada de Stephania rotunda (Menispermaceae) inhibía las etapas anulares al regular a la baja las hendiduras de Maurer, la isoliensinina afectó profundamente la transición trofozoíto-esquizogonía en etapa tardía. Esta discrepancia de actividad perceptible podría indicar efectos químicos estructurales de estos compuestos. El examen microscópico de los parásitos tratados sugirió que la isoliensinina actuó durante o después del inicio de la replicación del ADN, lo que perjudicó las divisiones y segregaciones nucleares plasmodiales exitosas. La formación de esquizontes correspondiente a la fase M se caracteriza por múltiples divisiones mitóticas asincrónicas estrechamente reguladas [85], que involucran a varios actores moleculares aún no resueltos. Si bien en general se acepta que los BBIQ muestran una alta afinidad por los objetivos dependientes de cationes divalentes Ca2+, no estaba claro si la isoliensinina siguió un camino similar para ejercer sus efectos antipalúdicos. Sin embargo, el tratamiento con isoliensinina pareció comprometer importantes proteínas reguladoras requeridas para la homeostasis iónica y la división mitótica durante la esquizogonía. De énfasis crítico, el fenotipo ejercido refleja los efectos antipalúdicos de varios inhibidores de los canales iónicos [32, 81, 84]. Aunque este mecanismo podría ser en parte predominante, la falla mitótica del esquizonte observada sugiere efectos efectores indirectos por medio de mensajeros secundarios, como se propone para un agente BBIQ relacionado contra el cáncer, la tetrandrina [86]. Los iones celulares libres como el Ca2+ impulsan eventos importantes de citocinesis [87], y la interrupción bidireccional podría subrayar los fenotipos de parásitos observados a partir del desequilibrio del pH citosólico y las señales efectoras inhibidoras.

Intrigados por los efectos del tratamiento observados y la exploración parcial relativa de los mecanismos de acción antipalúdicos de varios BBIQ, se minaron computacionalmente los objetivos de la isoliensinina. Dichos intentos de dilucidar el mecanismo de acción de la isoliensinina en función de sus huellas dactilares químicas nos llevaron a postular la participación del transporte transmembrana y las proteínas reguladoras de la división mitótica, lo que respalda los efectos del tratamiento fenotípico observado. El análisis reveló un enriquecimiento de; Pf3D7_0904900 (Cu2+ ATPase), Pf3D7_1352100 (Mdr6), Pf3D7_1303500 (Nhe-1), Pf3D7_1235200 (Vp2) y Pf3D7_0830500 destacan una interacción activa con transportadores de soluto transmembrana de cationes monovalentes y divalentes, así como el tráfico de aminoácidos. Estudios previos han demostrado que los inhibidores del transportador de solutos son potentes gametocitocidas [22, 30, 41]. Como se informó una alta expresión de proteínas enriquecidas en la membrana en los gametocitos en etapa tardía [88], y teniendo en cuenta el hecho de que estos compuestos antes mencionados se dirigen a los transportadores de iones de membrana, nuestros datos, por lo tanto, respaldan el argumento de que los gametocitos en etapa tardía son probablemente permeables a los iónicos. disruptores de la homeostasis. En los asexuales, estos transportadores de solutos transmembrana mantienen la homeostasis de iones citosólicos y son dianas farmacológicas atractivas para varios antipalúdicos [89]. Algunos de estos transportadores de iones transmembrana son refractarios a las deleciones genéticas condicionales, por lo que son indispensables para las replicaciones esquizogónicas del parásito. Guiado por las fuertes distorsiones morfológicas, era poco probable, por lo tanto, excluir un posible mecanismo similar que implicara el transporte transmembrana de la acción antipalúdica de la isoliensinina.

Además, se observaron efectos perceptibles en los esquizontes tratados que no lograron dividir su material nuclear. El enriquecimiento objetivo de las proteínas de Plasmodium previstas mostró el mayor número de reguladores del ciclo celular previamente caracterizados que podrían subrayar la detención del desarrollo observada. Por ejemplo, modificadores de cromatina; Pf3D7_1211600 (LSD1), Pf3D7_0809900 (JmjC1) y Pf3D7_1212900 (BDP2) alcanzan su punto máximo de expresión durante los esquizontes [90], y es razonable que los efectos correspondientes de la isoliensinina en esta etapa fueran más pronunciados. Los fármacos dirigidos a la epigenética [91] ejercen actividades antiasexuales y gametocitocidas prometedoras. Entre otros objetivos farmacológicos identificados a través de las predicciones requeridas para el desarrollo exitoso de esquizontes se encuentran la cisteína proteasa calpaína dependiente de Ca2+ (Pf3D7_1362400), PI4K (Pf3D7_0509800) [92], dfhr-TS (Pf3D7_0417200), CDPK7 (Pf3D7_1123100), PKB (Pf3D 7_1246900), y caseína quinasa 2 (Pf3D7_1108400) [93]. Sin embargo, a partir de los análisis de acoplamiento molecular, se observó una notable afinidad por cuatro proteínas quinasas de división mitótica esenciales; Se observaron PfNek1, PfCLK1, PfCLK4 y PfMap2. Los ortólogos para estas proteínas quinasas estabilizan la unión del cinetocoro-microtúbulo de los centrosomas para regular los eventos mitóticos de protozoos y la progresión del ciclo celular [94, 95], lo que brinda oportunidades para la orientación de fármacos. En Plasmodium, las quinasas tipo quinasa dependientes de ciclina (CLK) fosforilan sustratos de factor de corte y empalme pre-ARNm ricos en serina/arginina. Se ha informado que sus eliminaciones químicas inhiben la transición trofozoíto-esquizonte, alteran el desarrollo de gametocitos y reducen las exflagelaciones de gametos masculinos y la prevalencia de infección por mosquitos al 50% [82, 83]. El gen A de Plasmodium nunca en mitosis (PfNek1) regula el ciclo celular en la transición trofozoíto/esquizonte y los gametocitos masculinos [96], mientras que PfMap2 se expresa durante asexuales, ookinetes y es esencial para la gametogénesis masculina [97]. Razonablemente, no es sorprendente que la interacción potencial de isoliensinina con estas proteínas quinasas de Plasmodium podría haber conducido a resultados de tratamiento similares.

A medida que los enfoques in silico de las propiedades ADME para un nuevo compuesto bioactivo podrían formular estrategias para su optimización estructural, los análisis demostraron un perfil farmacocinético aceptable para la isoliensinina. Se identificaron estudios de priorización adicionales destinados a mejorar su similitud con los medicamentos para inclinarse hacia la solubilidad en agua y la reducción del peso molecular al límite aceptable < 500.

La principal estrategia de validación de la actividad de bloqueo de la transmisión de la malaria para cualquier fármaco candidato es predominantemente a través de un ensayo de alimentación de membrana estándar de mosquitos (SMFA). Sin embargo, se considera que la interrupción de la formación y maduración de los esquizontes podría reducir la gametocitemia por Plasmodium. Además, la eliminación selectiva de los gametocitos IV/V en etapa tardía por parte de la isoliensinina es una vía notable hacia la reducción de los parásitos infecciosos y las futuras exploraciones SMFA de este agente antipalúdico. Los SMFA informarán más sobre los posibles mecanismos de difusión para el despliegue de tecnologías que implementan isoliensinina para apuntar a vectores o en la interfaz del huésped humano. En resumen, los hallazgos demostraron que la isoliensinina, un BBIQ aislado de los rizomas de C. pariera, es un agente antipalúdico que es selectivamente gametocitocida. Este estudio recomienda que la limitación de la lectura microscópica para la estimación de la actividad gametocitocida se resuelva y valide mediante mejores ensayos de fluorescencia. Aún así, la evidencia proporcionada respalda los esfuerzos adicionales de caracterización y desarrollo de este prometedor andamio de plomo que bloquea la transmisión de la malaria con un perfil ADME óptimo.

Todos los datos generados o analizados durante este estudio se incluyen en este artículo y sus archivos de información adicional.

Burrows JN, Duparc S, Gutteridge WE, Hooft van Huijsduijnen R, Kaszubska W, Macintyre F, et al. Nuevos desarrollos en perfiles de productos y candidatos objetivo contra la malaria. Malar J. 2017;16:26.

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Yahiya S, Rueda-Zubiaurre A, Delves MJ, Fuchter MJ, Baum J. El panorama de detección de antipalúdicos: mirando más allá de la etapa de sangre asexual. Curr Opin Chem Biol. 2019;50:1–9.

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Sinden RE. Desarrollo de estrategias de bloqueo de la transmisión para el control de la malaria. Patog de PLoS. 2017;13: e1006336.

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Joice R, Nilsson SK, Montgomery J, Dankwa S, Egan E, Morahan B, et al. Las etapas de transmisión de Plasmodium falciparum se acumulan en la médula ósea humana. Sci Transl Med. 2014;6:244re5-244re5.

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Dearnley M, Chu T, Zhang Y, Looker O, Huang C, Klonis N, et al. La remodelación reversible de la célula huésped sustenta los cambios de deformabilidad en las etapas sanguíneas sexuales del parásito de la malaria. Proc Natl Acad Sci USA. 2016;113:4800–5.

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Schneider MP, Liu B, Glock P, Suttie A, Mchugh E, Andrew D, et al. La alteración del ensamblaje del complejo de la membrana interna bloquea el desarrollo de la etapa sexual de Plasmodium falciparum. Patog de PLoS. 2017;13: e1006659.

Artículo Google Académico

De Niz M, Meibalan E, Mejia P, Ma S, Brancucci NMB, Agop-Nersesian C, et al. Los gametocitos de Plasmodium muestran localización y transmigración vascular en la médula ósea del huésped. ciencia avanzada 2018;4:eaat3775.

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Ramdani G, Naissant B, Thompson E, Breil F, Lorthiois A, Dupuy F, et al. La señalización de cAMP regula la deformabilidad de los eritrocitos infectados con gametocitos requerida para la transmisión del parásito de la malaria. Patog de PLoS. 2015;11: e1004815.

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Naissant B, Dupuy F, Duffier Y, Lorthiois A, Duez J, Scholz J, et al. La fosforilación de Plasmodium falciparum STEVOR regula la deformabilidad de los eritrocitos del huésped que permite la transmisión del parásito de la malaria. Sangre. 2016;127:e42–53.

Artículo CAS PubMed Google Académico

Florens L, Washburn MP, Raine JD, Anthony RM, Grainger M, Haynes JD, et al. Una visión proteómica del ciclo de vida de Plasmodium falciparum. Naturaleza. 2002;419:520–6.

Artículo CAS PubMed Google Académico

Khan SM, Franke-fayard B, Mair GR, Lasonder E, Janse CJ, Mann M, et al. El análisis del proteoma de gametocitos masculinos y femeninos separados revela una nueva biología de Plasmodium específica del sexo. Celúla. 2005; 121:675–87.

Artículo CAS PubMed Google Académico

Macrae JI, Dixon MWA, Dearnley MK, Chua HH, Chambers JM, Kenny S, et al. Metabolismo mitocondrial de las etapas sanguíneas sexuales y asexuales del parásito de la malaria Plasmodium falciparum. BMC Biol. 2013;11:67.

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Srivastava A, Philip N, Hughes KR, Georgiou K, MacRae JI, Barrett MP, et al. Cambios específicos de etapa en el metabolismo de Plasmodium requeridos para la diferenciación y adaptación a diferentes ambientes de huéspedes y vectores. Patog de PLoS. 2016;12: e1006094.

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Coetzee N, Sidoli S, van Biljon R, Painter H, Llinás M, Garcia BA, et al. La proteómica cuantitativa de la cromatina revela un paisaje dinámico de modificación postraduccional de histonas que define a los parásitos Plasmodium falciparum asexuales y sexuales. Sci Rep. 2017;7:607.

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Walzer KA, Kubicki DM, Tang X, Chi J-TA. El análisis de una sola célula revela una expresión génica distinta y heterogeneidad en gametocitos de Plasmodium falciparum masculinos y femeninos. mEsfera. 2018;3:e00130-e218.

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

van Biljon R, van Wyk R, Painter HJ, Orchard L, Reader J, Niemand J, et al. El control transcripcional jerárquico regula la diferenciación sexual de Plasmodium falciparum. BMC Genómica. 2019;20:920.

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Adjalley SH, Johnston GL, Li T, Eastman RT, Ekland EH, Eappen AG, et al. La evaluación cuantitativa del desarrollo sexual de Plasmodium falciparum revela una potente actividad bloqueadora de la transmisión por el azul de metileno. Proc Natl Acad Sci USA. 2011;108:E1214–23.

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Beshir KB, Sutherland CJ, Sawa P, Drakeley CJ, Okell L, Mweresa CK, et al. La parasitemia residual por Plasmodium falciparum en niños de Kenia después de la terapia de combinación con artemisinina se asocia con una mayor transmisión a los mosquitos y la recurrencia del parásito. J Infecciones Dis. 2013;208:2017–24.

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Witmer K, Dahalan FA, Delves MJ, Yahiya S, Watson OJ, Straschil U, et al. Transmisión de parásitos de la malaria resistentes a la artemisinina a los mosquitos bajo presión de fármacos antipalúdicos. Quimioterapia de agentes antimicrobianos. 2020;AAC.00898-20.

Vanaerschot M, Lucantoni L, Li T, Combrinck JM, Ruecker A, Kumar TRS, et al. Las hexahidroquinolinas son candidatas a antipalúdicos con una potente actividad de bloqueo de transmisión y etapa sanguínea. Nat Microbiol. 2017;2:1403–14.

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Sun W, Huang X, Li H, Tawa G, Fisher E, Tanaka TQ, et al. Nuevas estructuras de plomo con actividad en estadio sanguíneo asexual y gametocitocida de Plasmodium falciparum identificadas a partir de la detección de compuestos de alto rendimiento. Malar J. 2017;16:147.

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Sun W, Tanaka TQ, Magle CT, Huang W, Southall N, Huang R, et al. Firmas químicas y nuevos objetivos farmacológicos para el desarrollo de fármacos gametocitocidas. Sci Rep. 2014;4:3743.

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Tanaka TQ, Dehdashti SJ, Nguyen DT, McKew JC, Zheng W, Williamson KC. Un ensayo cuantitativo de alto rendimiento para identificar compuestos gametocitocidas. Mol Biochem Parasitol. 2013; 188: 20–5.

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Sanders NG, Sullivan DJ, Mlambo G, Dimopoulos G, Tripathi AK. La pantalla gametocitocidal identifica nuevas clases químicas con actividad de bloqueo de la transmisión de Plasmodium falciparum. Más uno. 2014;9: e105817.

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Almela MJ, Lozano S, Lelièvre J, Colmenarejo G, Coterón JM, Rodrigues J, et al. Un nuevo conjunto de puntos de partida químicos con el potencial de bloqueo de la transmisión de Plasmodium falciparum para el descubrimiento de fármacos antipalúdicos. Más uno. 2015;10: e0135139.

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Plouffe DM, Wree M, Du AY, Meister S, Li F, Patra K, et al. Ensayo de alto rendimiento y descubrimiento de pequeñas moléculas que interrumpen la transmisión de la malaria. Microbio huésped celular. 2016;19:114–26.

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Lucantoni L, Fidock DA, Avery VM. Ensayo de alto rendimiento basado en luciferasa para la detección y perfilado de compuestos que bloquean la transmisión contra gametocitos de Plasmodium falciparum. Quimioterapia de agentes antimicrobianos. 2016;60:2097–107.

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Miguel-Blanco C, Molina I, Bardera AI, Díaz B, de las Heras L, Lozano S, et al. Hundreds of dual-stage antimalarial molecules discovered by a functional gametocyte screen. Nat Commun. 2017;8:15160.

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Delves MJ, Miguel-Blanco C, Matthews H, Molina I, Ruecker A, Yahiya S, et al. Una pantalla de alto rendimiento para pistas de próxima generación dirigidas a la transmisión del parásito de la malaria. Nat Comun. 2018;9:3805.

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Paonessa G, Siciliano G, Graziani R, Lalli C, Cecchetti O, Alli C, et al. Quimiotipos bloqueadores de la transmisión específicos de gametocitos y en todas las etapas de la sangre descubiertos a partir de un cribado de alto rendimiento en gametocitos de Plasmodium falciparum. Biol común. 2022;5:547.

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Peatey CL, Spicer TP, Hodder PS, Trenholme KR. Gardiner DL Un ensayo de alto rendimiento para la identificación de fármacos contra los gametocitos de Plasmodium falciparum en etapa tardía. Mol Biochem Parasitol. 2011;180:127–31.

Artículo CAS PubMed Google Académico

Rottmann M, McNamara C, Yeung BKS, Lee MCS, Zou B, Russell B, et al. Espiroindolonas, una clase de compuestos potentes para el tratamiento de la malaria. Ciencia. 2010;329:1175–80.

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Baragaña B, Hallyburton I, Lee MCS, Norcross NR, Grimaldi R, Otto TD, et al. Un nuevo agente antipalúdico de múltiples etapas que inhibe la síntesis de proteínas. Naturaleza. 2015;522:315–20.

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Jimenez-Diaz MB, Ebert D, Salinas Y, Pradhan A, Lehane AM, Myrand-Lapierre ME, et al. (+)-SJ733, un candidato clínico para la malaria que actúa a través de ATP4 para inducir una eliminación rápida de Plasmodium mediada por el huésped. Proc Natl Acad Sci USA. 2014;111:E5455–62.

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Le Bihan A, de Kanter R, Angulo-Barturen I, Binkert C, Boss C, Brun R, et al. Caracterización del nuevo compuesto antipalúdico ACT-451840: evaluación preclínica de actividad y modelado de dosis-eficacia. PLoS Med. 2016;13: e1002138.

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Paquet T, Le MC, Cabrera DG, Younis Y, Henrich PP, Abraham TS, et al. Eficacia antipalúdica de MMV390048, un inhibidor de la fosfatidilinositol 4-quinasa de Plasmodium. Sci Transl Med. 2017;9:eaad9735.

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Chaparro MJ, Calderón F, Castañeda P, Fernández-Alvaro E, Gabarró R, Gamo FJ, et al. Efforts aimed to reduce attrition in antimalarial drug discovery: a systematic evaluation of the current antimalarial targets portfolio. ACS Infect Dis. 2018;4:568–76.

Artículo CAS PubMed Google Académico

Amoah LE, Kakaney C, Kwansa-Bentum B, Kusi KA. Actividad de las hierbas medicinales en los gametocitos de Plasmodium falciparum: Implicaciones para la transmisión de la malaria en Ghana. Más uno. 2015;10: e0142587.

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Balaich JN, Mathias DK, Torto B, Jackson BT, Tao D, Ebrahimi B, et al. Las lactonas sesquiterpénicas no artemisinina partenina y partenolida bloquean la transmisión de la etapa sexual de Plasmodium falciparum. Quimioterapia de agentes antimicrobianos. 2016;60:2108–17.

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Czesny B, Goshu S, Cook JL, Williamson KC. El inhibidor del proteosoma Epoxomicina tiene una potente actividad gametocitocida contra Plasmodium falciparum. Quimioterapia de agentes antimicrobianos. 2009;53:4080–5.

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Alessandro SD, Corbett Y, Ilboudo DP, Misiano P, Dahiya N, Abay SM, et al. Salinomicina y otros ionóforos como una nueva clase de fármacos antipalúdicos con actividad bloqueadora de la transmisión. Quimioterapia de agentes antimicrobianos. 2015;59:5135–44.

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Pastrana-mena R, Mathias DK, Delves M, Rajaram K, King JG, Yee R, et al. Un derivado del ácido (+)-Usnic que bloquea la transmisión de malaria previene la maduración del cigoto a oocineto de Plasmodium en el intestino medio del mosquito. ACS Chem Biol. 2016;11:3461–72.

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Moyo P, Shamburger W, van der Watt ME, Reader J, de Sousa ACC, Egan TJ, et al. Alcaloides de naftilisoquinolina, validados como productos naturales antiplasmodiales multietapas de éxito. Int J Parasitol Drogas Resistencia a las drogas. 2020;13:51–8.

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Jones IW, Denholm AA, Ley SV, Lovell H, Wood A, Sinden RE. El desarrollo sexual de los parásitos de la malaria es inhibido in vitro por el extracto de Neem Azadirachtin y sus análogos semisintéticos. FEMS Microbiol Lett. 1994; 120: 267–73.

Artículo CAS PubMed Google Académico

Abay SM, Lucantoni L, Dahiya N, Dori G, Dembo EG, Esposito F, et al. Actividades de bloqueo de la transmisión de Plasmodium de extractos de Vernonia amygdalina y compuestos aislados. Malar J. 2015;14:288.

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Moyo P, Kunyane P, Selepe MA, Eloff JN, Niemand J, Louw AI, et al. Aislamiento guiado por bioensayo e identificación de compuestos gametocitocidas de Artemisia afra (Asteraceae). Malar J. 2019;18:65.

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Niu G, Wang B, Zhang G, King JB, Cichewicz RH, Li J. Apuntar al mosquito FREP1 con un metabolito fúngico bloquea la transmisión de la malaria. Sci Rep. 2015;5:14694.

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Forkuo AD, Ansah C, Mensah KB, Annan K, Gyan B, Theron A, et al. Interacción antipalúdica in vitro y actividad gametocitocida de la criptolepina. Malar J. 2017;16:496.

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Soré H, Lopatriello A, Ebstie YA, Tenoh Guedoung AR, Hilou A, Pereira JA, et al. Antipalúdicos selectivos de etapa de Plasmodium de la corteza del tallo de Lophira lanceolata. fitoquímica. 2020;174: 112336.

Artículo PubMed Google Académico

Goodman CD, Austarheim I, Mollard V, Mikolo B, Malterud KE, Mcfadden GI, et al. Productos naturales de Zanthoxylum heitzii con potente actividad contra el parásito de la malaria. Malar J. 2016;15:481.

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Sirignano C, Snene A, Rigano D, Formisano C, Luciano P, El MR, et al. Germacranólidos angeloilados de Daucus virgatus y su actividad bloqueadora de la transmisión de Plasmodium. J Nat Prod. 2017;80:2787–94.

Artículo CAS PubMed Google Académico

Lopatriello A, Soré H, Habluetzel A, Parapini S, D'Alessandro S, Taramelli D, et al. Identificación de un agente antipalúdico gametocitocida potente y selectivo a partir de la corteza del tallo de Lophira lanceolata. Química Bioorg. 2019;93: 103321.

Artículo CAS PubMed Google Académico

Fernández-Álvaro E, Hong WD, Nixon GL, O'Neill PM, Calderón F. Quimioterapia antipalúdica: desarrollo inspirado en productos naturales de candidatos preclínicos y clínicos con diversos mecanismos de acción. J Med Chem. 2016;59:5587–603.

Artículo PubMed Google Académico

SchiffPL. Alcaloides de bisbencilisoquinolina. J Nat Prod. 1991;54:645–749.

Artículo CAS PubMed Google Académico

Kadioglu O, Law BYK, Mok SWF, Xu SW, Efferth T, Wong VKW. Análisis del modo de acción de la neferina, un alcaloide de bisbencilisoquinolina de Lotus (Nelumbo nucifera) contra células tumorales multirresistentes. Frente Farmacol. 2017;8:238.

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Meng XL, Chen ML, Chen CL, Gao CC, Li C, Wang D, et al. Los alcaloides de bisbencilisoquinolina del embrión de semilla de loto (Nelumbo nucifera Gaertn.) inhiben la activación de macrófagos inducida por lipopolisacáridos a través de la supresión de la vía Ca2+-CaM/CaMKII. Food Agric Immunol. 2019;30:878–96.

Artículo CAS Google Académico

Brochet M, Billker O. Señalización de calcio en parásitos de la malaria. Mol Microbiol. 2016;100:397–408.

Artículo CAS PubMed Google Académico

Haruki K, Bray PG, Ono M, Ward SA. Potente mejora de la sensibilidad de Plasmodium falciparum a la cloroquina por el alcaloide bisbencilisoquinolina cefarantina. Quimioterapia de agentes antimicrobianos. 2000;44:2706–8.

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Chea A, Bun SS, Azas N, Gasquet M, Bory S, Ollivier E, et al. Actividad antiplasmodial de tres alcaloides de bisbencilisoquinolina del tubérculo de Stephania rotunda. Nat Prod Res. 2010;24:1766–70.

Artículo CAS PubMed Google Académico

Desgrouas C, Chapus C, Desplans J, Travaille C, Pascual A, Baghdikian B, et al. Actividad antiplasmodial in vitro de la cefarantina. Malar J. 2014;13:327.

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Ye Z, Van Dyke K. Actividad antipalúdica de varios alcaloides de bisbencilisoquinolina y aporfina-bencilisoquinolina y sus relaciones estructura-actividad contra la malaria in vitro por Plasmodium falciparum sensible y resistente a la cloroquina. Eliminación del control malar. 2015;5:1.

CAS Google Académico

Zahari A, Ablat A, Sivasothy Y, Mohamad J, Choudhary MI, Awang K. Actividades antiplasmodiales y antioxidantes in vitro de los alcaloides de bisbencilisoquinolina de Alseodaphne corneri Kosterm. Asiático Pac J Trop Med. 2016;9:328–32.

Artículo CAS PubMed Google Académico

[Artículo gratuito de PMC] [PubMed] Tomita M, Furukawa H, Yang TH, Lin TJ. Sobre los alcaloides de Nelumbo nucifera Gaertn. VIII. Estudios sobre los alcaloides del embrión de loti. (1). Estructura de la isoliensinina, un nuevo alcaloide tipo biscoclaurina. Chem Pharm Bull. 1965; 13:39–43.

Artículo CAS Google Académico

Tshibangu JN, Wright AD, König GM. Aislamiento por HPLC de los alcaloides de bisbencilisoquinona activos antiplasmodiales presentes en las raíces de Cissampelos mucronata. Phytochem Anal An Int J Plant Chem Biochem Tech. 2003; 14:13–22.

Artículo CAS Google Académico

Trager W, Jensen JB. Parásitos de la malaria humana en cultivo continuo. Ciencia. 1976; 193: 673–5.

Artículo CAS PubMed Google Académico

Akala HM, Eyase FL, Cheruiyot AC, Omondi AA, Ogutu BR, Waters NC, et al. Perfil de sensibilidad a fármacos antipalúdicos de aislamientos de campo de Plasmodium falciparum en el oeste de Kenia determinado mediante un ensayo in vitro SYBR Green I y análisis molecular. Soy J Trop Con Hyg. 2011;85:34–41.

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Eyase FL, Akala HM, Ingasia L, Cheruiyot A, Omondi A, Okudo C, et al. El papel de Pfmdr1 y Pfcrt en el cambio de la susceptibilidad a la cloroquina, la amodiaquina, la mefloquina y la lumefantrina en muestras de P. falciparum del oeste de Kenia durante 2008–2011. Más uno. 2013;8:e64299.

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Cheruiyot J, Ingasia LA, Omondi AA, Juma DW, Opot BH, Ndegwa JM, et al. Los polimorfismos en los genes Pfmdr1, Pfcrt y Pfnhe1 están asociados con actividades in vitro reducidas de quinina en aislamientos de Plasmodium falciparum del oeste de Kenia. Quimioterapia de agentes antimicrobianos. 2014;58:3737–43.

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Achieng AO, Ingasia LA, Juma DW, Cheruiyot AC, Okudo CA, Yeda RA, et al. La susceptibilidad reducida a la doxiciclina in vitro en aislamientos de campo de Plasmodium falciparum de Kenia está asociada con el polimorfismo de secuencia PfTetQ KYNNNN. Quimioterapia de agentes antimicrobianos. 2014;58:5894–9.

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Spalding MD, Eyase FL, Akala HM, Bedno SA, Prigge ST, Coldren RL, et al. Aumento de la prevalencia del mutante quíntuple pfdhfr/phdhps y aparición rápida de mutaciones de resistencia a pfdhps en los codones 581 y 613 en Kisumu. Kenia Malar J. 2010;9:338.

Artículo CAS PubMed Google Académico

Hemming-Schroeder E, Umukoro E, Lo E, Fung B, Thomas-Sunday P, Zhou G, et al. Impactos de los medicamentos antipalúdicos en los marcadores de resistencia a los medicamentos de Plasmodium falciparum, oeste de Kenia, 2003–2015. Soy J Trop Con Hyg. Rev. 2018;98:692–9.

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Malmquist NA, Moss TA, Mecheri S, Scherf A, Fuchter MJ. Los inhibidores de la histona metiltransferasa de molécula pequeña muestran una rápida actividad antipalúdica contra todas las formas del estadio sanguíneo en Plasmodium falciparum. Proc Natl Acad Sci USA. 2012;109:16708–11.

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Delves MJ, Straschil U, Ruecker A, Miguel-Blanco C, Marques S, Dufour AC, et al. Cultivo in vitro de rutina de gametocitos de P. falciparum para evaluar nuevas intervenciones de bloqueo de la transmisión. Protocolo Nat. 2016;11:1668.

Artículo CAS PubMed Google Académico

Wadi I, Pillai CR, Anvikar AR, Sinha A, Nath M. Deformaciones morfológicas inducidas por azul de metileno en gametocitos de Plasmodium falciparum: implicaciones para el bloqueo de la transmisión. Malar J. 2018;17:11.

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Gamo FJ, Sanz LM, Vidal J, de Cozar C, Alvarez E, Lavandera JL, et al. Miles de puntos de partida químicos para la identificación de plomo antipalúdico. Naturaleza. 2010;465:305–10.

Artículo CAS PubMed Google Académico

Zhang X, Wang X, Wu T, Li B, Liu T, Wang R, et al. La isoliensinina induce la apoptosis en células de cáncer de mama humano triple negativo a través de la generación de ROS y la activación de p38 MAPK/JNK. Sci Rep. 2015;5:12579.

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Kashiwada Y, Aoshima A, Ikeshiro Y, Chen YP, Furukawa H, Itoigawa M, et al. Alcaloides de bencilisoquinolina anti-VIH y flavonoides de las hojas de Nelumbo nucifera, y correlaciones estructura-actividad con alcaloides relacionados. Bioorg Med Chem. 2005;13:443–8.

Artículo CAS PubMed Google Académico

Kennedy K, Cobbold SA, Hanssen E, Birnbaum J, Spillman NJ, McHugh E, et al. La muerte retardada en el parásito de la malaria Plasmodium falciparum es causada por la interrupción del tráfico intracelular dependiente de la prenilación. PLoS Biol. 2019;17: e3000376.

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Sonoiki E, Ng CL, Lee MCS, Guo D, Zhang YK, Zhou Y, et al. Un potente benzoxaborol antipalúdico se dirige a un homólogo del factor de especificidad de escisión y poliadenilación de Plasmodium falciparum. Nat Comun. 2017;8:14574.

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Hoepfner D, Mcnamara CW, Lim CS, Studer C, Riedl R, Aust T, et al. Inhibición selectiva y específica de Plasmodium falciparum lysyl-tRNA sintetasa por el metabolito secundario fúngico cladosporina. Microbio huésped celular. 2012;11:654–63.

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Suárez-Cortés P, Gambara G, Favia A, Palombi F, Alano P, Filippini A. La inhibición de Ned-19 del crecimiento y multiplicación de parásitos sugiere un papel para la señalización mediada por NAADP en el desarrollo asexual de Plasmodium falciparum. Malar J. 2017;16:366.

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Alam MM, Sanchez-Azqueta A, Janha O, Flannery EL, Mahindra A, Mapesa K, et al. Validación de la proteína quinasa PfCLK3 como diana farmacológica contra la malaria multietapa entre especies. Ciencia. 2019;365:eaau1682.

Artículo CAS PubMed Google Académico

Kern S, Agarwal S, Huber K, Gehring AP, Strödke B, Wirth CC, et al. La inhibición de las quinasas CLK que fosforilan la proteína SR de Plasmodium falciparum altera la replicación en el estadio sanguíneo y la transmisión de la malaria. Más uno. 2014;9: e105732.

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Asahi H, Tolba MEM, Tanabe M, Sugano S, Abe K, Kawamoto F. La perturbación de la homeostasis del cobre es fundamental en la detención temprana del desarrollo de Plasmodium falciparum intraeritrocitario. BMC Microbiol. 2014;14:167.

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Rudlaff RM, Kraemer S, Marshman J, Dvorin JD. Ultraestructura tridimensional de Plasmodium falciparum a lo largo de la citocinesis. Patog de PLoS. 2020;16: e1008587.

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Wang G, Lemos JR, Iadecola C. Tetrandrina alcaloide a base de hierbas: de un bloqueador de canales iónicos a un inhibidor de la proliferación tumoral. Tendencias Pharmacol Sci. 2004;25:120–3.

Artículo CAS PubMed Google Académico

Significa AR. Calcio, calmodulina y regulación del ciclo celular. FEBS Lett. 1994;347:1–4.

Artículo CAS PubMed Google Académico

Tao D, Ubaida-Mohien C, Mathias DK, King JG, Pastrana-Mena R, Tripathi A, et al. La división por sexos del proteoma de gametocitos en etapa V de Plasmodium falciparum proporciona información sobre la biología celular específica de falciparum. Proteómica de células molares. 2014;13:2705–24.

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Meier A, Erler H, Beitz E. Orientación de canales y transportadores en infecciones por parásitos protozoarios. Química frontal. 2018;6:88.

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Bozdech Z, Zhu J, Joachimiak MP, Cohen FE, Pulliam B, DeRisi JL. Perfil de expresión de las etapas de esquizonte y trofozoíto de Plasmodium falciparum con una micromatriz de oligonucleótidos largos. Genoma Biol. 2003;4:R9.

Artículo PubMed PubMed Central Google Académico

Coetzee N, von Grüning H, Opperman D, van der Watt M, Reader J, Birkholtz LM. Los inhibidores epigenéticos se dirigen a múltiples etapas de los parásitos Plasmodium falciparum. Sci Rep. 2020;10:2355.

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

McNamara CW, Lee MCS, Lim CS, Lim SH, Roland J, Nagle A, et al. Apuntando a Plasmodium PI (4) K para eliminar la malaria. Naturaleza. 2013;504:248–53.

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Solyakov L, Halbert J, Alam MM, Semblat J-P, Dorin-Semblat D, Reininger L, et al. Global kinomic and phospho-proteomic analyses of the human malaria parasite Plasmodium falciparum. Nat Commun. 2011;2:565.

Artículo PubMed Google Académico

Chen CT, Gubbels MJ. El centrosoma de Toxoplasma gondii es la plataforma para la gemación hija interna como lo revela un mutante de quinasa Nek1. Ciencia celular J. 2013;126:3344–55.

CAS PubMed PubMed Central Google Académico

Saldivia M, Wollman AJM, Carnielli JBT, Jones NG, Leake MC, Bower-Lepts C, et al. Una vía de señalización CLK1-KKT2 que regula el ensamblaje del cinetocoro en Trypanosomabrucei. MBío. 2021;12:e00687-e721.

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Dorin-Semblat D, Schmitt S, Semblat JP, Sicard A, Reininger L, Goldring D, et al. Quinasa Pfnek-1 relacionada con NIMA de Plasmodium falciparum: especificidad sexual y evaluación de la esencialidad para el ciclo asexual eritrocitario. Microbiología. 2011;157:2785–94.

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Tewari R, Straschil U, Bateman A, Böhme U, Cherevach I, Gong P, et al. El análisis funcional sistemático de las proteínas quinasas de Plasmodium identifica reguladores esenciales de la transmisión por mosquitos. Microbio huésped celular. 2010;8:377–87.

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

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Agradecemos la asistencia técnica de Edwin W. Mwakio, Farid S. Abdi y Charles O. Okudo del Laboratorio de Resistencia a Medicamentos contra la Malaria (MDR) en la Dirección de Investigación Médica del Ejército de EE. UU. - África (USAMRD-A), Estación de Campo Kisian.

Este estudio fue apoyado por el Premio de Becas de Posgrado de la Junta de Préstamos para la Educación Superior (HELB) y la Fundación Internacional para la Ciencia (IFS), Estocolmo, Suecia, a través de una subvención número I-1-F-6439-1 otorgada a JMM*. Los organismos de financiación no participaron en el diseño del estudio y la recopilación, el análisis y la interpretación de los datos y en la redacción del manuscrito.

James M. Mutunga, Meshack A. Obonyo, Merid N. Getahun, Ramadhan S. Mwakubambanya, Hoseah M. Akala, Agnes C. Cheruiyot, Redemptah A. Yeda, Dennis W. Juma, Ben Andagalu, Jaree L. Johnson y Amanda L Roth

Dirección actual: Escuela de Diseño de Ingeniería, Tecnología y Programas Profesionales, Universidad Estatal de Pensilvania, University Park, PA, 16802, EE. UU.

Departamento de Bioquímica, Universidad de Agricultura y Tecnología Jomo Kenyatta (JKUAT), Nairobi, Kenia

Jackson M. Muema y Joel L. Bargul

Dirección de Investigación Médica del Ejército de EE. UU.-África (USAMRD-A), Centro de Investigación en Salud Global (CGHR), Instituto de Investigación Médica de Kenia (KEMRI), Kisumu, Kenia

Jackson M. Muema, James M. Mutunga, Hosea M. Akala, Agnes C. Cheruiyot, Redemptah A. Yeda, Dennis W. Juma, Ben Andagalu, Jaree L. Johnson y Amanda L. Roth

Departamento de Ciencias Biológicas, Escuela de Ciencias Puras y Aplicadas, Universidad Mount Kenya, Thika, Kenia

James M. final

Departamento de Bioquímica y Biología Molecular, Universidad de Egerton, Egerton, Kenia

Meshack A. Obonyo y Ramadhan S. Mwagambanya

Centro Internacional de Fisiología y Ecología de Insectos (Icipe), Nairobi, Kenia

Merid N. Getahun y Joel L. Bargul

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JMM*, JMM, MAO, HMA, RSM y JLB diseñaron los estudios experimentales y supervisaron la recopilación de datos. MNG, HMA, DWJ, BA, JLJ, ALR, JLB proporcionaron los materiales de estudio. JMM* ejecutó gran parte de los ensayos de detección con la asistencia técnica de ACC y RAY. JMM* realizó análisis de datos y escribió el primer borrador del manuscrito. Todos los autores revisaron y aprobaron la versión final del manuscrito. Todos los autores leyeron y aprobaron el manuscrito final.

Correspondencia a Jackson M. Muema o Joel L. Bargul.

No aplica.

Los autores declaran que no tienen intereses contrapuestos.

Springer Nature se mantiene neutral con respecto a los reclamos jurisdiccionales en mapas publicados y afiliaciones institucionales.

: Métodos S1; Tabla S1: Detección antipalúdica de extractos de plantas utilizando el ensayo SYBR Green I; Tabla S2: Lecturas de actividad antipalúdica de fracciones solventes de C. pariera; Tabla S3: Susceptibilidades ex vivo inmediatas de aislados clínicos de Plasmodium a la isoliensinina en relación con los fármacos antipalúdicos estándar en µM; Tabla S4: Objetivos de proteína de isoliensinina previstos; Tabla S5: acoplamiento molecular de objetivos de Plasmodium a isoliensinina; Tabla S6: perfil de predicción ADME que incluye isoliensinina de la plataforma SWISSADME. Fig. S1: Cissampelos pariera en su ecosistema natural y los rizomas de la raíz; Fig. S2: Fragmentación LC-MS/MS de isoliensinina.

Acceso abierto Este artículo tiene una licencia internacional Creative Commons Attribution 4.0, que permite el uso, el intercambio, la adaptación, la distribución y la reproducción en cualquier medio o formato, siempre que se otorgue el crédito correspondiente al autor o autores originales y a la fuente. proporcionar un enlace a la licencia Creative Commons e indicar si se realizaron cambios. Las imágenes u otro material de terceros en este artículo están incluidos en la licencia Creative Commons del artículo, a menos que se indique lo contrario en una línea de crédito al material. Si el material no está incluido en la licencia Creative Commons del artículo y su uso previsto no está permitido por la regulación legal o excede el uso permitido, deberá obtener el permiso directamente del titular de los derechos de autor. Para ver una copia de esta licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/. La renuncia de Creative Commons Public Domain Dedication (http://creativecommons.org/publicdomain/zero/1.0/) se aplica a los datos disponibles en este artículo, a menos que se indique lo contrario en una línea de crédito a los datos.

Reimpresiones y permisos

Muema, JM, Mutunga, JM, Obonyo, MA et al. La isoliensinina de los rizomas de Cissampelos pariera exhibe actividades gametocitocidas y antipalúdicas potenciales contra los aislamientos clínicos de Plasmodium falciparum. Malar J 22, 161 (2023). https://doi.org/10.1186/s12936-023-04590-7

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Recibido: 24 diciembre 2022

Aceptado: 15 de mayo de 2023

Publicado: 20 mayo 2023

DOI: https://doi.org/10.1186/s12936-023-04590-7

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